Rapid Running Buffer(简称RRB)缓冲液是快速核酸电泳缓冲液,主要用于琼脂糖凝胶电泳。RRB为白色至类白色速溶颗粒。RRB速溶颗粒是指将日常实验工作中用到的RRB缓冲液以速溶颗粒的形式呈现。RRB速溶颗粒使用简单、快速,无需计算、称量、调节pH等繁琐的配液过程,即取即用;此外,RRB速溶颗粒的标准化大规模生产工艺可避免人为配液过程中的误差,保证缓冲液的批内及批间稳定性。
RRB缓冲液拥有缓冲能力强,分辨率高的特点,可有效分离5KB以内的DNA片段。将RRB缓冲液和一定浓度琼脂糖凝胶结合,可支持300-350 V(15 V/cm)的高压、高速电泳,将常规电泳时间大幅度减少(30分钟缩短至10分钟左右)。 而且RRB 缓冲液还能够替代 TBE 缓冲液用于低分子量 DNA 的琼脂糖凝胶电泳。 |
1.配制1×RRB工作缓冲液
1)烧杯中加入约600 mL的蒸馏水,内置磁性搅拌子后置于磁力搅拌器上;
2)用剪刀剪开或撕开RRB速溶颗粒包装袋,将包装袋内得全部内容物缓慢倒入烧杯,搅拌至完全溶解; 3)向步骤2的RRB溶液中添加蒸馏水,定容至1 L,所得溶液即为1×RRB工作缓冲液。 2.电泳 ①常规电泳 1×RRB缓冲液可替代TBE缓冲液进行常规电泳,实现小分子量DNA片段的有效分离。 ②快速电泳 推荐使用浓度为1.5%的琼脂糖凝胶,电压调节至300~350 V(15 V/cm),可在10 min内实现100~5000 bp DNA片段的有效分离。 |