从新鲜组织中制备高活性和高质量的单细胞悬液是单细胞转录组测序=至关重要的一步。骨组织主要由骨细胞和骨基质组成，由于有大量骨盐沉积，使得骨组织非常坚硬。因此在对骨组织进行消化时，比较困难。
中科百抗骨组织解离试剂盒主要是采用酶消化法对骨组织（包含软骨和硬骨）进行解离消化，解决骨组织解离难度大的问题，完成单细胞悬液的制备。本试剂盒相比其他方法，操作简单，且效果稳定，经解离后得到的细胞活性高，细胞碎片率低，可进一步用于单细胞测序等各类细胞实验。以下是使用中科百抗骨组织解离试剂盒对骨组织进行解离的方法：
准备工作：水浴锅设置到37℃、配制含5% FBS的PBS。
1.取一个5 mL离心管，按说明书加入相应的骨组织解离液1和RPMI 1640培养基，混匀。
2.将骨组织用PBS清洗干净，剪碎，并转移到第1步准备好的溶液中，摇晃混匀。
3.放在37℃水浴锅中20 min。过程中，每隔3 ~ 5 min摇晃混匀。
4.消化20 min结束后，4℃，300 ×g离心5 min，弃上清。
5.向沉淀中加入RPMI 1640培养基，吹打混匀，4℃，300 ×g离心5 min，弃上清。
6.向沉淀中加入相应体积的RPMI 1640培养基和骨组织解离液2，吹打混匀，置于37℃水浴锅中6 h~14 h，可过夜消化。
7.不同类型、状态的骨组织消化时间不同，每隔一定的时间质检一次细胞悬液，根据细胞总量及活性等确定消化停止时间。
8.消化完成后，用70 μm细胞筛进行过滤，收集滤液于新的15 mL离心管中。
9.向消化的离心管加入RPMI 1640培养基中，上下颠倒涮洗管壁，涮洗液同样经过同一个70 μm细胞筛进行过滤，将滤液收集到第8步的15 mL离心管中。
10.重复步骤9两次，共洗3次，共收集滤液12 mL。
11.将收集液于4℃，300 ×g离心5 min，弃上清。
12.用含5% FBS的PBS重悬沉淀，吹打混匀，4℃，300×g离心5 min，弃上清。
13.重复步骤12一次，共清洗两次。
14.继续用含5% FBS的PBS重悬沉淀，重悬液的体积根据所需的细胞浓度进行调整。
15.用细胞计数仪对细胞悬液进行质控并记录。
16.质控结束后请立即进行后续实验。
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