唾液是由唾液腺分泌液、龈沟液和黏膜渗出液等构成的混合性液体,储存了大量的人类口腔微生物和口腔局部组织及身体其它部位感染微生物和病毒的DNA、RNA和蛋白质多样性等复杂生物学信息。唾液采集具有非侵袭性,有较高的可重复性,安全而廉价,因此唾液组学慢慢的引起了人们的重视。随着唾液基因组学、转录组学、蛋白质组学、微生物组学、代谢组学和miRNA等领域的研究进展,唾液DNA提取已是认识和早期诊断某些口腔疾病和全身系统性疾病较为实用和可靠的方法,唾液组学在疾病诊断中尚处于早期研究阶段。
人体口腔黏膜的上皮细胞具有代谢旺盛、更新快、易脱落的特点,可以自然脱落到唾液中,也可以在外力作用下剥落到载体上。这些脱落口腔细胞虽然细胞核会固缩,但同样具有完整的人类基因组DNA序列。因此唾液可以代替血液成为基因组DNA的简易来源。
人每天分泌唾液在1.0-1.5 L左右,里面包含大量的消化酶、溶菌酶、免疫球蛋白、各种无机盐离子以及白细胞、口腔脱落细胞、各种菌体细胞甚至是病毒,唾液样本分析是人体健康的重要指标之一。那么,我们一般要选择哪种试剂盒从拭子样本中进行唾液DNA提取呢?
中科百抗离心柱法唾液&拭子基因组DNA提取试剂盒经过多方实验验证,可以作为最优选择。本产品适用于从400μL唾液和含保存液拭子样本中进行唾液DNA提取和拭子总DNA提取。试剂盒基于硅膜柱纯化技术,利用特殊硅基质吸附材料和相应的缓冲液体系特异性吸附DNA,通过清洗和离心步骤以有效去除杂质和各种酶抑制剂,最后使用低盐缓冲液洗脱获得纯化的DNA产物。使用本产品纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、RT-PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记、NGS等下游分子生物学实验。
使用离心柱法唾液&拭子基因组DNA提取试剂盒的注意事项:
1)提前准备恒温振荡器 (或水浴锅)并预热至70℃,建议设置震荡速度为1,000 rpm/min(若使用水浴锅操作,期间需将内容物颠倒混匀2-3次)。
2)Buffer AW1和Buffer AW2在使用前需按照试剂瓶标签所示加入无水乙醇进行稀释后使用。