目前,主流的血液基因组DNA提取试剂盒有磁珠法和硅胶膜离心柱法,这两种方法各有利弊。磁珠法可以针对大批量样本的处理,满足自动化工作的需要,但是提取核酸纯度低,提取得率低;硅胶膜离心柱法提取的核酸纯度高,提取效率高,对目标基因或DNA含量较低的样本提取,具有比较明显的优势,但不易自动化操作。一般来说,科研用户的样本量不会太多,首要的还是提高核酸纯度和提取效率,因而科研用户主要还是选择离心柱法。大型医疗机构样本量较多,一般都会选用自动法的磁珠法。但一些样本量不太多的临床医院或检测机构,出于方便和准确诊断的要求,还是会选择离心柱法。
首先,将静脉血液样本添加到试剂盒中,加入血液抗凝剂,并通过离心步骤将血液细胞与血浆分离。
将血液细胞沉淀洗涤后,加入细胞裂解缓冲液,破坏细胞膜释放DNA,并加入蛋白酶K来消化细胞蛋白。
加入乙酸和异丙醇使DNA凝固和沉淀,然后通过离心将DNA沉淀从上清液中分离出来。
将DNA沉淀用乙酸盐缓冲液洗涤,去除杂质和残余的蛋白酶。
用无水溶液或TE缓冲液溶解DNA,之后将其储存在低温下,以供后续实验使用。
综上所述,血液基因组DNA提取试剂盒通过细胞裂解、DNA沉淀和溶解等步骤实现对血液样本中的DNA的高效提取与纯化。
中科百抗血液基因组DNA提取试剂盒适用于从200 μL抗凝血液样本中提取高质量基因组DNA。试剂盒基于硅膜柱纯化技术,利用特殊硅基质吸附材料和相应缓冲液体系特异性吸附DNA,通过清洗和离心步骤以有效去除杂质和酶抑制剂,最后使用低盐缓冲液洗脱获得纯化的DNA。使用本产品纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、RT-PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记、NGS等下游分子生物学实验。