贴壁细胞的传代是一项常见的细胞培养技术，用于维持贴壁细胞的生长和繁殖。以下是传代贴壁细胞的常规步骤：
1.准备培养基：准备好新鲜的完全培养基，并预热至37°C。
确保所有操作在无菌条件下进行，包括使用无菌的移液器、培养皿和试剂。
2.观察细胞：使用显微镜检查细胞的生长状态，确保细胞达到适宜的传代密度（一般为70-80%融合）。
3.去除旧培养基：小心地吸除培养皿或培养瓶中的旧培养基，避免干扰细胞。
4.清洗细胞：向细胞中加入无菌的PBS（磷酸盐缓冲液），轻轻摇动培养皿或瓶子，去除残留的培养基。然后吸除PBS。
5.细胞消化：加入适量的细胞消化液（如Neptry胰酶细胞消化液、0.25%胰蛋白酶-EDTA），使其覆盖细胞层。将细胞培养皿或瓶子放入37°C的培养箱中，消化2-5分钟（具体时间根据细胞类型调整）。
使用显微镜观察细胞是否已脱落。一旦细胞开始脱落，用PBS或培养基中止胰蛋白酶的作用。
6.收集细胞：
吸取细胞悬液到离心管中，并用PBS或培养基洗涤细胞。通过离心（通常为1000 rpm，5分钟）沉淀细胞。
7.细胞计数：使用计数板或自动细胞计数仪进行细胞计数，确定细胞浓度。
8.重新接种：根据所需的细胞密度，将细胞重新接种到新的培养皿或瓶子中，并加入适量的完全培养基。
9.培养：将新的培养皿或培养瓶放入37°C、5% CO₂的培养箱中继续培养，直到细胞达到所需的生长密度。
10.定期观察细胞的生长情况，检查细胞的健康状况，确保没有细胞凋亡或受到污染。
了解更多有关细胞培养的问题，欢迎咨询中科百抗。
